超微(wei)量(liang)分光光度計(ji)在核(he)酸/蛋白定量(liang)中(zhong)的(de)核(he)心作用

　　超微(wei)量(liang)分光光度計(ji)憑借(jie)其(qi)高靈敏度(du)、快速檢測和(he)微(wei)量(liang)樣(yang)本需(xu)求(qiu)的特(te)點(dian)，已成為現代(dai)生(sheng)命(ming)科學實(shi)驗(yan)室中(zhong)核(he)酸與蛋白質定量(liang)的(de)核(he)心工(gong)具。其(qi)核心作用體現在以(yi)下(xia)三個方(fang)面：

　　壹、高(gao)靈敏度(du)與(yu)寬(kuan)檢(jian)測範(fan)圍(wei)，實(shi)現精(jing)準(zhun)定量(liang)

　　傳(chuan)統(tong)分光光度計(ji)需1-2mL樣(yang)本體積，而超微(wei)量(liang)分光光度計(ji)僅需(xu)0.5-2μL樣(yang)本，通(tong)過(guo)表面張力固(gu)定於檢(jian)測基(ji)座(zuo)表面，極(ji)大降(jiang)低(di)了(le)珍(zhen)貴樣(yang)本（如(ru)臨床(chuang)活(huo)檢(jian)組織、稀(xi)有細胞裂解液(ye)）的消耗(hao)。其(qi)檢(jian)測(ce)下限可(ke)達0.5ng/μL（dsDNA），上(shang)限(xian)擴展至(zhi)37,500ng/μL（dsDNA），覆(fu)蓋從低豐度(du)樣(yang)本到(dao)高濃度純(chun)化產物的(de)全範(fan)圍(wei)定量(liang)需(xu)求(qiu)。例如，在(zai)NGS文庫(ku)構建中(zhong)，可(ke)準(zhun)確(que)測(ce)定文庫(ku)濃度至(zhi)nM級(ji)別，確保文庫(ku)池均衡性(xing)。

　　二、多波(bo)長(chang)同(tong)步(bu)檢測，保障(zhang)數(shu)據(ju)可(ke)靠性

　　通(tong)過(guo)230nm、260nm、280nm、320nm四(si)波(bo)長(chang)同(tong)步(bu)掃描，可(ke)同時獲取(qu)核(he)酸純度（A260/A280）、蛋白質純度（A280/A260）及鹽(yan)離子(zi)汙(wu)染(ran)（A230/A260）信息。例如，純(chun)DNA的A260/A280比(bi)值(zhi)應(ying)為1.8-2.0，若(ruo)低(di)於1.8可(ke)能提(ti)示蛋白質或苯酚汙(wu)染(ran)；而A260/A230比值低(di)於2.0則(ze)表明(ming)存在(zai)鹽類或(huo)有(you)機(ji)溶劑(ji)殘(can)留。這(zhe)種(zhong)多參(can)數(shu)分析(xi)模式顯(xian)著(zhu)提(ti)升(sheng)了(le)定量(liang)結果的(de)準(zhun)確(que)性(xing)，避(bi)免了(le)單波(bo)長(chang)檢(jian)測(ce)的局限性。

　　三(san)、快速無損檢測，優化(hua)實(shi)驗(yan)流(liu)程

　　單次檢測僅需(xu)2-5秒，且樣(yang)本無需(xu)稀釋或(huo)特(te)殊(shu)處(chu)理(li)（如熒(ying)光染(ran)料(liao)標記），直(zhi)接(jie)使用(yong)原(yuan)始(shi)樣(yang)本即(ji)可(ke)完(wan)成檢測。這壹特(te)性(xing)在高通(tong)量(liang)實(shi)驗(yan)中(zhong)尤(you)為(wei)重(zhong)要(yao)——例如，在(zai)CRISPR基因(yin)編輯(ji)實(shi)驗(yan)中(zhong)，可(ke)快速測定gRNA合成產物的(de)濃度與(yu)純度(du)，指(zhi)導(dao)後(hou)續轉(zhuan)染(ran)體系(xi)優(you)化；在蛋白質表達純化過程(cheng)中(zhong)，可(ke)實(shi)時監(jian)測(ce)洗脫(tuo)峰中(zhong)目(mu)標蛋白的(de)濃度變化(hua)，及時(shi)調(tiao)整收集策略(lve)。此(ci)外(wai)，檢測(ce)後樣(yang)本可(ke)回收用於下(xia)遊實(shi)驗(yan)（如PCR、Westernblot），避免了(le)傳統(tong)方(fang)法(fa)中(zhong)樣(yang)本損耗(hao)導(dao)致(zhi)的(de)實(shi)驗(yan)重復。

　　總結：超微(wei)量(liang)分光光度計(ji)通(tong)過(guo)微(wei)量(liang)樣(yang)本檢(jian)測、多參(can)數(shu)分析(xi)和(he)快速無損操(cao)作，為核(he)酸與蛋白質定量(liang)提(ti)供(gong)了(le)高效(xiao)、精(jing)準(zhun)的(de)解(jie)決(jue)方(fang)案(an)，成為現代(dai)分子(zi)生(sheng)物(wu)學實(shi)驗(yan)室的核心設備(bei)。